RAW 264.7細胞(別名:RAW264.7、RAW-264.7等)是一種源自Abelson鼠科白血病病毒誘導腫瘤的小鼠單核巨噬細胞白血病細胞系,具有典型的巨噬細胞功能特性。該細胞系廣泛用于免疫學、炎癥反應及腫瘤微環(huán)境研究,因其無需胰酶消化、易傳代的特點,成為實驗中常用的工具細胞。
種屬:小鼠(Mus musculus)
組織來源:Abelson病毒誘導的腫瘤;單核細胞/巨噬細胞起源
生長特性:貼壁生長,禁用胰酶消化(胰酶會誘導分化)
細胞形態(tài):不規(guī)則形,存在少量分化細胞(屬正?,F(xiàn)象)
生物安全等級:BSL-2(需在二級生物安全柜操作)
培養(yǎng)方案(默認方案A)
基礎培養(yǎng)基:DMEM([PM150210])
添加物:10% FBS([164210]) + 1% 雙抗(青霉素-鏈霉素,[PB180120])
無需額外成分:已包含細胞生長所需全部營養(yǎng),直接使用
氣體環(huán)境:空氣(95%)+ CO?(5%)
溫度:37℃
推薦傳代比例:1:2 至 1:8(根據(jù)細胞密度調(diào)整)
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基
胰酶禁忌:嚴禁使用胰酶消化!胰酶會刺激細胞分化,建議用細胞刮刀輕柔吹打傳代。
傳代時效性:超過3天未傳代可能導致細胞自發(fā)分化,需密切監(jiān)控密度。
分化現(xiàn)象:培養(yǎng)過程中出現(xiàn)少量分化細胞屬正常,無需過度處理。
凍存與復蘇:
凍存液配方:55% 基礎培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO
儲存條件:液氮(-196℃)長期保存,避免反復凍融。
吞噬與抗原呈遞:可胞飲中性紅,吞噬乳膠顆?;蚪湍妇厶?,具備巨噬細胞典型功能。
免疫調(diào)控研究:LPS或PPD刺激后可誘導紅細胞分解,適用于炎癥信號通路(如TLR4)研究。
腫瘤微環(huán)境模型:用于模擬巨噬細胞與腫瘤細胞相互作用,篩選免疫調(diào)節(jié)藥物。
細胞起源:由Abelson病毒誘導的小鼠白血病模型建立,表面抗原sIg?、Ia?、Thy-1.2?。
病毒安全性:XC斑點形成試驗陰性,無病毒顆粒分泌。
保藏信息:ATCC(TIB-71)、ECACC(91062702)權-威機構保藏。
傳代步驟:
吸棄舊培養(yǎng)基,PBS輕洗1-2次。
加入適量新鮮培養(yǎng)基,用細胞刮刀輕柔刮取貼壁細胞,吹打分散后分瓶。
凍存技巧:
收集對數(shù)期細胞,離心后重懸于預冷凍存液,逐步降溫(-1℃/min)后轉入液氮。
復蘇要點:
快速融化(37℃水?。?,離心去除DMSO后重懸,避免過度吹打。
RAW 264.7細胞以其穩(wěn)定的巨噬細胞功能和便捷的培養(yǎng)特性,成為免疫與腫瘤研究中的理想模型。嚴格遵循無胰酶操作及傳代時效性,可最大限度維持細胞活性與功能。