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雞卵泡顆粒細(xì)胞生理結(jié)構(gòu)是怎樣的?
雞卵泡顆粒細(xì)胞生理結(jié)構(gòu)是怎樣的?
更新時(shí)間:2022-11-03 | 點(diǎn)擊率:1486
雞卵泡顆粒細(xì)胞
分離自PMSG誘導(dǎo)后3天的雞卵巢組織,顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長(zhǎng)啟動(dòng)、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動(dòng)。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。細(xì)胞采用機(jī)械分離法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105個(gè)/瓶,細(xì)胞純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞為單層;次級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層;成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開(kāi)又變?yōu)閱螌?。顆粒細(xì)胞的胞核大而圓,著色深,細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長(zhǎng)突起伸入放射帶的凹陷部。
雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔,內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形,胞質(zhì)清亮,胞核圓形,細(xì)胞間可見(jiàn)許多毛細(xì)血管,外膜細(xì)胞位于較外層,多呈梭形,與周?chē)Y(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞,在卵泡開(kāi)始發(fā)育、卵細(xì)胞成長(zhǎng)的同時(shí),周?chē)牧庑渭?xì)胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮?fù)層,因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒,故稱(chēng)為顆粒細(xì)胞。
雞卵泡顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
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