常用的肝癌細胞有哪些?
1、SMMC-7721人肝癌細胞株
SMMC-7721細胞系是于1977年建立,材料取自一名50歲男性原發(fā)性肝細胞癌HCC患者的手術切除標本進行體外培養(yǎng)而得。其生物學特性如下:細胞系生長較迅速穩(wěn)定,在原代細胞開始傳代階段增殖緩慢,以后趨于穩(wěn)定而迅速生長;細胞形態(tài)為上皮樣;貼壁生長;細胞的亞微結(jié)構(gòu)形態(tài)符合癌細胞的一般特征;甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)免疫熒光染色呈陽性;LDH同工酶譜的變化與肝癌細胞的一般特征一致;免疫缺陷小鼠體內(nèi)可成瘤率高,動物異種后瘤結(jié)節(jié)經(jīng)病理切片檢查,其組織形態(tài)和原手術切除標本類似。
2、Bel-7402人肝癌細胞株
Bel-7402于1974年建立,來源于一位53歲男性肝癌患者的手術切除標本,屬于HCC。生物學特性如下:細胞增長迅速而恒定,6-7d可傳代1次;細胞形態(tài)以多邊形上皮樣占絕大多數(shù);貼壁生長;細胞染色體中有一大而長的近端著絲點染色體,出現(xiàn)頻率高,是本株細胞的標記染色體;AFP免疫熒光反應陽性;LDH、G6PD、TAT等酶代謝及細胞的超微結(jié)構(gòu)基本上保持臨床人體肝癌的特性;異種接種后成瘤率高,3-4d可成瘤,瘤塊組織學病理與臨床HCC相近。
3、MHCC97人肝癌細胞株
該細胞系由上海醫(yī)科大學中山醫(yī)院建立,將一名我國39歲男性HCC患者的肝右葉轉(zhuǎn)移病灶的手術切除標本接種于裸鼠肝內(nèi)建造出人肝癌裸鼠轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)而得。已證實,經(jīng)過再次分離得到的MHCC97H、MHCC97L及HCCLM33種細胞株,依據(jù)它們的轉(zhuǎn)移特點,雖來源同一父系,但具有異質(zhì)性,即具有不同的轉(zhuǎn)移潛能。
MHCC97人肝癌細胞系于1998年從裸鼠人肝癌轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)體外傳代培養(yǎng)獲得,該細胞系符合一般人惡性腫瘤的病理學和遺傳學特征,細胞呈上皮樣,貼壁生長,血清HBsAg、AFP高表達,成瘤率高且優(yōu)先轉(zhuǎn)移的靶器官是肺,肺轉(zhuǎn)移率*,故證實該細胞系為高轉(zhuǎn)移特性的人肝癌細胞系。
2001年,研究者從MHCC97細胞系中發(fā)現(xiàn)并分離出不同轉(zhuǎn)移潛能的2個細胞系MHCC97-H和MHCC97-L,前者肺轉(zhuǎn)移率*,后者40%;從生長速度上,前者細胞倍增時間較后者短;穿透人工基底膜能力前者較后者大;前者均較后者活力強、代謝旺。傳代至20代后,兩種形態(tài)學特征及生長速度方面均較穩(wěn)定。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉(zhuǎn)移潛能的HCCLM3細胞系。
4、HepG2人肝母細胞瘤
1979年,從阿根廷一名15歲高加索男孩的原發(fā)性肝胚細胞瘤中分離出并建立,該細胞系呈上皮樣;貼壁抱團生長;生長較快,傳代周期為1-2d;低轉(zhuǎn)移;裸鼠中成瘤率較差;AFP陽性;HBsAg陰性,然而目前尚未證明該細胞中有乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)基因組;但通過實驗已證實,該細胞系分化程度較高,細胞里代謝酶的生物轉(zhuǎn)化特性較完整,不需加入外源性活化系統(tǒng)。在藥物作用相關研究中代謝酶保持穩(wěn)定,不會因傳代次數(shù)增多而有所改變,所含有的生物轉(zhuǎn)化代謝酶與人正常肝實質(zhì)細胞同源,因此,常被用于體外肝細胞代謝或遺傳毒性試驗方面的理想細胞系.其中,HepG2.2.15是目前應用較為廣泛的細胞株,它是HepG2的衍生物是體外篩選抗HBV藥物的良好模型,并用于抗HBV新藥開發(fā)的體外研究工具。
5、Hep3B人肝癌細胞株
Hep3B分離自8歲美國黑人男童的肝癌組織.細胞形態(tài)跟HepG2類似,呈上皮細胞,電鏡下觀察胞漿里面很多粗大的黑顆粒,同樣喜抱團貼壁生長;其在裸鼠中能致瘤,但基本不轉(zhuǎn)移.HBV陽性,這與HepG2不同,這株細胞整合了完整的HBV基因組,可用于HBV感染后發(fā)展致癌相關研究。
6、Huh-7人肝癌細胞株
該細胞系于1982年從一名患有肝癌的57歲日本男性肝癌組織標本上培養(yǎng)而得。該細胞AFP陽性,高度分化,細胞呈上皮樣,貼壁生長.特點是HBV陰性,而具有丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)易感性,故可用于HCV與肝癌的關系的研究.除了用于研究致癌性,還用于基因表達的調(diào)節(jié)機制、新陳代謝及VLDL的分泌等.此細胞系的特別之處如下:可用于生產(chǎn)重組蛋白如促紅細胞生成素;在蛋白質(zhì)生物學方面用于研究在肝細胞內(nèi)復制的登革病毒;廣泛用于異種移植動物模型.
7、PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細胞
PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細胞于1976年建系,細胞來自一位患有原發(fā)性HCC的莫桑比克男性患者的標本;為上皮樣貼壁生長;AFP陽性,不產(chǎn)生白蛋白;分泌ad亞型的HBsAg而不產(chǎn)生HBcAg或HBeAg和Dane顆粒,卻可維持HAV的繁殖;該細胞可能含有全部HBV基因組,同工酶譜及核型與人類同源;裸鼠異種移植可致瘤.此細胞系因其產(chǎn)生HBsAg的物理化學和免疫化學特性跟HBV攜帶者血清中HBsAg相似,因此,可被用來研究HBV體外病毒及其與原發(fā)性肝癌的關聯(lián),抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備及抗病藥物的制備等方面。
人肝癌細胞系具有以下優(yōu)點:
首先,在選擇實驗對象的比較上,人肝癌細胞系相較于人原代肝細胞,克服了人原代肝細胞來源困難、實驗難控制、存活時間短的局限,肝癌細胞系為已獲得的穩(wěn)定傳代的細胞,具有來源方便、操作簡單、條件可控和可重復等優(yōu)點,是用于肝癌疾病相關研究的理想對象。
其次,肝癌細胞系均選擇來源于確診肝癌患者的病理組織,具有與肝癌患者體內(nèi)相似的遺傳基因組,其發(fā)生發(fā)展機制、功能蛋白表達、病毒復制能力、侵襲轉(zhuǎn)移功能及抗藥性等,具有與人類親源體極其相近的特點,因此更適合應用于肝癌各領域的研究。