RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW 264.7細(xì)胞不分泌可檢測(cè)到的病毒顆粒,XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。RAW 264.7細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖,并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)RAW 264.7細(xì)胞分解紅血球,但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無(wú)作用。
1.首先,觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)及時(shí)與Procell技術(shù)支持聯(lián)系。2.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出進(jìn)行觀察。
3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
4.可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中,備用;細(xì)胞傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5.確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
6.建議客戶收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和Procell技術(shù)支持溝通交流。